近年来国内随着鱼病防治工作的加强,一些技术用于鱼病的诊断,鱼病诊断技术正在向健康、快速、准确的方向发展。目前主要有以下几种诊断技术。
1、荧光抗体技术(fat、免疫荧光技术)
是在免疫学、生物化学和显微镜的基础上建立起来的一项技术,以荧光色素标记病鱼的抗原或抗体,与其相应的抗原或抗体相结合,在荧光显微镜下呈现一种特异性的荧光反应。
该技术的优点是:特异性强,敏感性高,检出速度快。缺点是:非特异性染色尚未完成解决,结果判断的客观性不足,技术程序比较复杂。
2、免疫酶技术(eat)
是根据抗原和抗体特异性结合,以酶作为标记物,酶对病鱼底物具有高效催化作用的原理建立的。酶标抗体或抗原与其相对应的抗原或抗体相结合后,形成酶标抗体一抗原复合物。复合物酶遇到相当应的底物时,底物被氧化分解,生成有色物质。
可用显微镜或光电比色定性、定量检测相对应抗原或抗体。此法灵敏度高,标本易久存。
3、中和试验技术
是测定鱼类的抗体或抗原中和抗原或抗体的能力。主要用于病毒鉴定和病毒性抗体的测定及查获无征象的带病鱼。
4、对流免疫电泳技术
是一种琼脂扩散与电泳原理,用以分析鱼类免疫血清或抗原组分的有效方法,可在30—90分钟内检出抗体。
5、反向间接血球凝集反应技术
是当颗粒性(如细菌)和相应抗体结合后,在电解质存在的条件下出现凝集反应。可用凝集反应测定病鱼中抗体效价。
6、核酸探针技术
其原理为碱基配对,互补的两条核酸链通过退火形成双链,这一过程称为核酸杂交。
核酸探针是带有标记物的已知序列的核酸片断,它能和与其互补的核酸序列杂交,形成双链,所以可用于待测核酸样品中特定基因序列的检测。
不同微生物其形态和体内物质成分不同,其基因也不同,通过分离和标记这些基因片断就可制成探针,用杂交的方法可以进行鱼类病原菌的鉴定。
7、单克隆抗体技术
主要用于病原诊断、病理诊断,随着微生物学、寄生虫学、免疫学的研究进展,人类对感染性和寄生虫性疾病有了新的认识,一个病原体存在着许多性质不同的抗原上,
采用杂交瘤技术,可以获得识别不同抗原,从而可以对感染性疾病和寄生虫病进行快速准确的诊断。
鱼体内残留的药物,受污染的情况,也可以利用抗生素或抗药的单克隆做定性或定量分析。