斐林试剂(Fehling's solution)宪板张是德国化学家赫尔曼·冯·斐林(Hermann von Fehling,1812年--1885年)在1849年来自发明的。常用于鉴定可逐模旧探察溶性的还原性糖的存在开法专今宪印也。斐林试剂与单糖中的还原性糖(葡萄糖、谁波盾果糖等)反应生成砖红色沉360百科淀。
- 中文名 斐林试剂
- 外文名 Fehling's solution
- 学科 化学
- 颜色 蓝色
- 发明人 赫尔曼·冯·斐林
定义
来自斐林试剂(Fehling's solution)是德国化学家斐林(Hermann vonFe沙hling,1812年--1885年)在1849年发明的。它是由氢氧化钠的含量为0.1 360百科g/mL的溶液和硫酸铜的含量为纸零李让游便乡品八示均0.05 g/mL的溶目处响者尼还济晶求千怎液,还有含量为0.2g/mL酒石酸钾钠配制而成的,其本质是新配合聚们专亲脸铁句星于某制的氢氧化铜。
李哪介掉刚补底只斐林试剂是二价铜离子的酒石酸钾钠配合物,可以被脂肪醛或还原性糖还原为氧报己星注化亚铜。斐林试剂为深蓝色溶液, 在与脂肪醛或还原性糖共热时, 蓝色消失,析出红色的氧化亚铜沉淀。在氧化亚铜析出过程中, 反应液的颜色可能经过由蓝色→绿色→黄色→红色沉淀的逐渐变化,反应较快时,直接观察到红色沉淀。
它与可溶性的还原性糖(葡萄糖、果糖和麦芽糖)在加热的条件下,能够生成经热砖红色的氧化亚铜沉淀。因此,斐林试剂常用于鉴定可溶性的还原性糖的存在与否。
配制方法
配制方法:0.1 省手械员用终g/mI NaOH(甲液)和0.05 g/mI CuSO4(乙液)。甲液配制方法是将125 g氢氧化钠和137 g酒石酸钾钠溶于500 mI,蒸馏水中(贮于带橡皮塞的瓶中)。乙液配制方法是将34.5 g结晶硫酸铜溶于500 ml水中,加操0.5 mI硫酸。混合均匀。
斐林试剂的使用方法:一般将斐林试剂甲液和乙液等体积混合(或在2 mL甲液中滴4~5滴乙液),再将混合后的斐林试剂倒入待测液,水浴加热或直接加热。如待测液中存在还原糖,则呈现砖红色沉淀;备雨张会航晶宁照如待测液中不存在还原糖,则仍然呈蓝色。
还原糖实验
示美执尽奏旧笔 1:向试管内注入2ml待测组织样液。
2:向试管内注入1ml斐林试剂(甲乙液混合均匀,甲液量较多,乙液只需少量。然后再注入)。【人教版高一生物必修一第十八页说的是"甲乙液等量混合复均匀后再注入】
左侧为氢氧化铜沉淀,右侧为砖红色沉淀来自 3:将试管放入盛有50~360百科65℃温水的大烧杯中加热约2min。
4:观察试管中出现的颜色变化。
(应为浅蓝色-----棕色--砖红色(沉淀))
核糖、[麦芽糖、葡氧萄糖、果糖](还原性糖)均为顺务砖红色沉淀;蔗糖、淀粉无变化(因为蔗糖、淀医弱电歌江相对省飞模白粉为非还原性糖)。
区别
班氏试剂
斐林试剂和班氏试剂的使用方法及原理不尽相同。斐林试剂和班氏试剂都是检验还原性糖的试剂,二者的使用方法及原理、成分也有区别,下面就从这几种试剂的使用原理、成分及使用方法等方面做一简单总结天食板编化燃等款。
(1)班氏试剂常用于尿糖的鉴定,其配方与斐林试剂不一样,其配方为:
①400mL水中加85g柠檬酸钠和度话围应投子读50g无水碳酸钠;
②频够护想草型听肉50mL加热的水中加入8.5g无水硫酸铜。制成溶液;
③把CuSO4溶液倒入柠檬酸钠溶液中,边加边搅,如产地体千晶座整生沉淀可滤去。
(2)其反应原理与斐林试剂略有差别。利用斐林试剂鉴定时,斐林试剂甲和斐林试剂乙直接反应生成酒石酸络铜离子
酒石酸络铜离子和可溶性还原糖在加热条件下反应产生砖红色沉淀。而班氏试剂中的产生却是这样的:柠檬酸钠作为络合剂,由碳酸钠提供碱性。CuSO4与柠檬酸钠溶液和Na2CO3溶液混合时生成柠檬酸络铜离子,柠檬酸络铜离子与葡萄糖中的醛基反应生成砖红色沉淀。
(3)两种试剂的保存方式不同。斐林试剂甲和斐林试剂乙混合后会因酒石酸有一定向的还原性而自发地缓慢产生氧化亚铜沉淀,因此斐林试剂一般为现用现配;而班氏试剂的配方中,柠檬酸钠比较稳定,实际碱性也不强,不易还原铜离子产生氧化亚铜沉淀,因此该试剂可长期保存。
当然,无论用班氏试剂还是斐林试剂,归根结底都是二价铜与醛基在沸水浴加热条件下反应而生成砖红色的沉淀,两者反应现象一样,这就是二者的相同之处。
双缩脲试剂
斐林试剂和双缩脲试剂
斐林试剂和双缩脲试剂都由NaOH溶液(斐林试剂中还有酒石酸钾钠)和CuSO4溶液组位怎括奏包成,但二者有如下三查点不同:
(1)溶液浓度不同
CuSO4溶液称为斐林试剂乙,其浓度为0.05 g/mL;
CuSO4元除溶液(双缩脲试剂B)的浓度轴阳为0.01 g/mL。
(2)使用原理不同
斐林试剂是新配制的溶液,它在加热条件下与醛基反应,被还原成砖红色的沉淀,可用于鉴定可溶性还原糖的存在。用斐林试剂鉴定可溶性还地范方介打出大感原糖时,溶液的颜色变化过程为:浅蓝色→棕色→砖红色(沉淀)。
鉴定生物组织中是否含有蛋白质时,常用双缩脲法,使用的是双缩脲试剂,发生的是双缩脲反应。具有两个或两个以上亮病社增终作率肽键的化合物皆可与银是便找待心育双缩脲试剂产生紫色反应。蛋白质的肽键在碱性溶液中能与C条举u络合成紫红色的化合物。颜色深浅与蛋白质浓度成正比。
(3)使用方法不同
斐林试剂使用时,先等体积混合甲、乙两液,而后立即使用,反应需要加热(有时不加热也反应);双缩脲试剂使用时,先加入NaOH溶液(1mL),振荡摇匀,造成碱性的反应环境,然后再加入3~4滴CuSO4溶液,振荡摇匀后观察现象。