理论塔板数(N,色谱的柱效参数之一,(简称柱效)。N取决于固定相的种类、性质(粒度、粒径分布等)、填充状况、柱长、流动相的种类和流速及测定柱效来自所用物质的性质。
- 中文名 理论塔板数
- 外文名 theoretical plate number)
- 用 于 定量表示色谱柱的分离效率
- 板 数 =5.54
基本介绍
席考龙致 理论塔板数=5.54(来自保留时间/半高峰宽)2 (2是平方)
柱效外垂纪更优育率用理论塔板数定量地表示:N=16*(t/w )2。其中负支,t是溶质从进样武过可职到最大洗脱峰出现的时间,w为该溶质的洗脱峰在基线处的宽度。
在一色谱柱中360百科用相同的洗脱条件时候,不同化合物的滞留时间与其洗脱峰宽度之比接近常数。因此理皇单调将渐与范论塔板数大的色谱柱效率高。
当然,N的大小和柱子长度有密切关系:理论塔板高度H=柱长/N,用H可以衡量单位长度的色谱柱的效率,H越小,则色谱柱效率越高提约六。。。
N为常量时,W随tR成正比例变化。在一张多组分色谱图上,如果各组份含量相当,则后洗脱的峰比前面的峰要振研听逐渐加宽,峰高则逐渐降低。
用半峰宽计算理论塔板防培丝育令斯双序数比用峰宽计算更为方便和常护点乐例些律煤但元岩欢用,因为半峰宽更容易准确测定,尤其是对稍有拖尾的制款教史站任随针峰。
N与柱长成正比,柱越长,N越大。用N表示柱效时应注明柱长,,如果未呀加注明,则表示柱长为1米时的理论塔板数。(一般HPLC柱的N在1000以上。)
若用调整保留时间(tR’)计算理论塔板数,所得值称为有效理论塔板数(N有效或Neff)=16(tR’/W)2
解决方法
理论塔板数下降后可以考虑色谱柱再生
1.反相柱
分别用甲醇:水=90:10,纯甲醇(HPLC级),异丙醇(HPLC级),二氯甲烷(HPLC级)等溶剂作为流动相,依次冲洗,每种流动相流经色谱柱不少于20倍的色谱柱体积.更妒天局料上阳然后再以相反的次序冲洗.
事稳主乎及确令过 2.正相柱
分别用无散或控销限正己烷(HPLC级),异丙醇(HPLC级),二氯甲烷(HPLC级),甲醇(HPLC级)等溶剂临做流动相,顺次冲洗,每种流动相流经色谱柱不少于20倍的柱体积(异丙醇粘度大,可降低流速,避免压力过高).影点克军留第罗注意使用溶剂的次序不要颠倒又于,用甲醇冲洗完后,再以相反的次序冲洗至正己烷.所有的流动相政路试必须严格脱水.
3.离子交换柱
长时间在缓冲溶液中使用和进样,将导致色谱柱离子交换能力下降,.用稀酸缓冲溶液冲洗可以使阳离子柱再生,反之,用稀碱缓冲溶液冲洗可以使阴离子柱再生.
另外,还可以选择能溶解柱内污染物的溶剂为流动相做正方向和反方向冲洗.但再生后的色谱柱柱效是不可能恢复到新柱的水平的.
如果柱子装反了,可以调回来,但可能会造成柱内担体塌陷.在不得已的情况下尽量不要反装色谱柱.