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酵母核酸

酵母核酸是从天然酵母中来自提取的核糖核酸,目前主要应用于医药亚怕功防初在错器、保健食品以及具世错干皇婴幼儿食品中,随着现代生物提取技术的发展,酵母核酸应用趋于广泛,尤其在抗癌新药、保健品及婴幼音文预负式副什贵思儿食品等方面取得了不少突破。酵母核酸产业的发展将360百科成为生物产业的一个亮星庆希数刻吧先省点。

  • 中文名 酵母核酸
  • 别名 酵母RNA
  • 特点 遗传物质
  • 用途 抗癌新药等
  • 目的 加深对核酸性质的认识

酵母核酸简介

  酵母核酸又称为酵母RNA,际另却观剧是从天然酵母中提取的核糖核酸。酵母由于种属不同,自身所含的核酸(RNA)由3--15%不等,核酸是重要的遗传物质,对生命体的意义非常重大(可以参照百科核糖核酸的介绍),因此近年来,国内外一些酵母生产的大公司,都先后依靠自身的酵母资源对酵母进行深加工综合利用,生产酵母核酸产品。

  酵母核酸是通过现代生物提取技术,将酵母中的核酸分离纯化,使核酸的纯度达到85%以上的产品,其目前主要应用于医药、保健食品以及婴幼儿食品中。市面上销售的酵母核酸分为粉体和膏体两种形态,含量从85--95类刻跳%不等,含量越高价格越贵。在国外酵母核酸的生产主要集中在巴西,我国每年进口巴西的酵母核酸大概在800吨左右,价值2-3亿,酵台了全球气和母核酸产品属于潜力产品,应用面不断扩大,市场处于供不应求的局面,因此在国内一些与酵母相关的公司也纷纷开始生产,但由于原料的不同产品质量层次不同。一些啤酒生产厂家利用生产啤酒的所剩的啤酒废酵母提取酵母核酸,因为原料质量差,产品质量很不稳定,一般酵母核酸的含量只有50%左右,而且相对转换率低,对后续生产加工影响大,因此国内的医药厂家只能高价购买国外的酵母RNA产品,随着自身技术的进步。

  酵母核酸应用趋于广泛,尤其在抗癌新药方面,作为前体合成物质;在婴幼儿食品中,酵母核酸经过降解后的核苷酸,对婴幼儿的生长发育尤为重要;在保健品中可以提高免疫、抗疲劳。酵母核酸产业的发展将是生物产业的另一个亮点。

良题心酵母核酸提取

目的

  学习来自和掌握从酵母中提制RNA 的原理和方法,从而360百科加深对核酸性质的认识。

原理

  提取和制备RNA 参青伟船洲财先棉源包布的首要问题是选RNA 含量刘贵凯斯越他川高的材料。微生物是工业上大量生产核酸的原料,其中RNA 的提制以酵母最为理想,因为酵母核酸中主要是RNA(2.67~10.轻势木宪若北足0%),DNA 很少(0.03~0.516%),而且菌体容易收集,RNA 也易于分离。此外,抽提后的菌体蛋白质(占干菌体的50%)仍具有战庆输很高的应用价值。

  RNA 提制过程首先要使RNA 从细胞中释放,并使它和蛋白质分离,然后将菌体除去。再根据核酸在等电点时谈务核测哪溶解度最小的性质,将pH 调至2.0~2.5云尼条,使RNA 沉淀,进行离美植故改市杀行物心收集。然后运用RNA 不溶于有机溶剂乙醇的特性,以乙醇洗涤RNA 沉淀。提取季做划没表RNA 的方法很多,在工业生产上常用的是稀碱法和浓盐法。稀碱法利用细胞壁在稀碱条件下溶解,使RNA 释放出来,这种方法提取时间短,但RNA 在稀碱条件下不稳定,容易被碱分解;浓盐法是在加热的条件下,利用高浓度的盐改变细胞膜的透性,使RNA 释放出来,临抗显解意端她练算日此法易掌握,产品颜色较好。使用浓盐法提出RNA 时应注意掌握温度,避免在20~70℃之间停留呀成这满静备时间过长,因为这是磷斤死响企孔系求价效川电酸二酯酶和磷酸单酯酶作用的温度范围,会使RNA 因降解而降低提取率。在90~100℃条件下加热可使蛋白质变性,破坏磷酸二斤脸款酯酶和磷酸单酯酶,有利于RNA 的提取。

实验材料、主要仪待钟派千器和试剂

  1.实验材料

  活性干酵母;pH0.5~5.0 的精密试纸;冰块。

  2.仪器

  (1)药物天平

  (2)三角瓶(100mL)

  (3)量筒(50mL)

  (4)水浴锅

  (5)电炉

  (6)试管木夹

  (7)离心管

  (8)离心机(4 000r/min)

  (9)烧杯(250mL, 50mL, 10mL)

  (10)滴管及玻棒

  (11)吸滤瓶(500mL)

  (12)布氏漏斗(60mm)

  (13)表面皿(8cm)

  (14)烘箱

  (15)干燥器

  (16)紫外可见分光光度计

  3.试剂

  (1)NaCl(化学纯)

  (2)6mol/L HCl

  (3)95%乙醇(化学纯)

操作步骤

  1.提取

  活性干酵母粉5g,倒入100mL 三角瓶中,加NaCl 5g,水50mL,搅拌均匀,置于沸水浴中提取1h。

  2.分离

  将上述提取液取出,立即用自来水冷却,装入大离心管内,以3 500r/min 离心10min,使提取液与菌体残渣等分离。

  3.沉淀RNA

  将离心得到的上清液倾于50mL 烧杯中,并置于放有冰块的250mL 烧杯中冷却,待冷至10℃以下时,用6mol/L HCl 小心地调节pH 至2.0~2.5。随着pH 下降,溶液中白色沉淀逐渐增加,到等电点时沉淀量最多(注意严格控制pH)。调好后继续于冰水中静置10min,使沉淀充分,颗粒变大。

  4.抽滤和洗涤

  上述悬浮液以3 000r/min 离心10min,得到RNA 沉淀。将沉淀物放在10mL 小烧杯内,用95%的乙醇5~10mL 充分搅拌洗涤,然后在铺有已称重滤纸的布氏漏斗上用真空泵抽气过滤,再用95%乙醇5~10mL 淋洗3 次。由于RNA 不溶于乙醇,洗涤不仅可脱水,使沉淀物疏松,便于过滤、干燥,而且可除去可溶性的脂类及色素等杂质,提高了制品的纯度。

  5.干燥

  从布氏漏斗上取下有沉淀物的滤纸,放在8cm 表面皿上,置于80℃烘箱内干燥。将干燥后的RNA 制品称重。

  6.含量测定

  称取一定量干燥后的RNA 产品配制成浓度为10~50μg/mL 的溶液,在751 型分光光度计上测定其260nm 处的光密度值,按下式计算RNA 含量:

酵母核酸提取

  式中:OD260nm 为260nm 处的光密度值;L 为比色杯的光径(cm);0.024 为1mL 溶液含有1μg RNA 的光密度值。

  结果计算

  根据含量测定的结果按下式计算提取率:

酵母核酸提取

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